人γ肽PγELISA試劑盒的操作步驟

 　　人γ肽PγELISA試劑盒用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。該試劑盒主要用于科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷。
　　
　　性能特征：
　　1、準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。
　　2、靈敏度：檢測(cè)濃度小于10pg/ml。
　　3、特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。
　　4、重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。
　　
　　操作步驟：
　　1、人γ肽PγELISA試劑盒樣本加樣：分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
　　2、溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
　　3、配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
　　4、洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
　　5、加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
　　6、顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘。
　　7、終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
　　8、測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。